Instruments de mesuremateriel comptage de levures

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Re: materiel comptage de levures

Message par goulven »

Je te conseille de prendre (ou de bricoler) un support pour les tubes. Sinon le reste c'est bon.
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Re: materiel comptage de levures

Message par gog3 »

oui, au fait il y est dans ma commande mais ne rentrait pas dans la capture d'ecran.
merci pour ton retour en tout cas.
petit a petit je vais bien finir par m'y mettre a les compter ces levures :whistle:
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Re: materiel comptage de levures

Message par Dab2 »

T'as une propipette, pour aspirer le liquide ?
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Re: materiel comptage de levures

Message par gog3 »

tu veux parler de ca:


Image

effectivement j'avais oublie.
merci pour le rappel.
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Re: materiel comptage de levures

Message par Dab2 »

Yep ! En passant, attention à ne pas y enfoncer la pipette trop profond, sur certains modèles ça peut déplacer la valve et après ça devient galère d'aspirer.
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gog3
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Re: materiel comptage de levures

Message par gog3 »

c'est note
merci du tuyau, et surtout du rappel
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Re: materiel comptage de levures

Message par WeDloMiS »

Très chers amis je vais avoir besoin de vos lumières. Depuis un petit moment, je voulais tenter l'expérience de faire du comptage de levures et tenter de faire une banque de celles que je considère comme courantes pour mes brassins.

Ce weekend, j'ai essayé de prendre le temps de me lancer dans cette nouvelle aventure qui me laisse pour le moins perplexe pour le moment.

J'ai ressorti du fond du frigo une Wyeast 3787 que j'avais récupérée en fin de primaire et décantée il y a maintenant 2 ans.

Les levures ont été prélevées après un décantage et mise dans des tubes de 45ml avec une solution isotonique. J'ai suivi à la lettre les tutos qu'on peut trouver sur le forum pour mettre ce process en place.

Je n'avais aucun espoir sur le taux de viabilité, c'était principalement pour de l'observation.

C'est là que les choses se compliquent.

J'ai fait un prélèvement de levure de 1ml que j'ai mélangé avec 0.5ml d'une solution de bleu de méthylène que j'avais préparé et j'ai ajouté 9,5ml de solution isotonique que j'avais en réserve. Soit un facteur 11 de dilution mais ca importe peu ici.

J'essaie de préparer une cellule de Neubauer de manière précise et ... surprise je ne vois quasiment aucune levure morte. Je vois quelques points complètement bleu mais assez rarement si je fais le ratio avec les points non colorés.

Je commence donc à émettre des doutes.

Est-ce-que ce que j'observe sont bien des levures ou ce sont des organismes tout autres ... ou des levures mortes mais que je repère mal.

J'observe des "cellules" (désolé pour le vocable pour les vrais scientifiques) avec une sorte de noyau, ou parfois 2 au sein d'une même cellule.

Ce soir, j'ai de nouveau préparé une cellule de comptage pour illustrer tout ça :

Image

La qualité n'est pas exceptionnelle mais avec un téléphone au bout du microscope, c'est du sport ... :D

Pour tenter de lever le doute sur les levures vivantes ou mortes, je me suis amusé à mettre une préparation identique au microonde, laisser refroidir et observer de nouveau ... et là surprise j'ai un peu plus de cellules bleues mais encore fortement en minorité par rapport aux autres.

Qu'est-ce-qui se passe ? :o :o

Qu'est-ce-que je fais mal ? J'observe tout autre chose que des levures ?

J'ai des levures super héros immortelles ? :lol: :lol: :alien: :alien:

Est-ce-que le bleu de méthylène peut avoir perdu toute son efficacité ? Et n'agit pas sur les levures mortes ? J'utilise de bleu de méthylène de ce type :



qu'on utilise en aquariophile pour les traitements de certaines maladies. J'avais préparé une solution que je conserve en bouteille depuis quelques mois. La solution peut avoir perdue ces propriétés ?

Je sèche ... une idée ? 8) 8)
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Re: materiel comptage de levures

Message par Jinac »

Est-ce que t'as attendu avec ta solution de bleau avant de rediluer ?

Généralement on dilue à la toute fin avec le bleu (rapport 1/1) et on attends plusieurs minutes pour laisser le temps de pénétrer...
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Re: materiel comptage de levures

Message par Cede »

Pas mieux que Jinac !

Tu dilues tes levures et ensuite tu balances la coloration, tu attends quelques minutes et tu comptes.
Il ne faut pas attendre une heure non plus, car au bout d'un long moment elles ont tendance à absorber le bleu.
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Re: materiel comptage de levures

Message par Hush »

Bonjour,
Pour ce que l'on peut distinguer sur ta photo, on dirait que tes levures ont formé des ascospores. Il faudrait les observer sur une lamelle à plus fort grossissement en cherchant à améliorer la qualité.
Peut être serait il préférable de commencer en observant une "levure neuve" . Tu réhydrates une pincée de levure et tu observes sur une lame classique, pas la cellule de comptage. Avec la cellule j'ai toujours un contraste moins bon et parfois des artefacts. Tu cherches le meilleur réglage. Tu colores et tu observes . Tu "génocides" la moitié de ta préparation en chauffant au micro onde comme tu as déjà fait, tu colores et tu observes toujours sur une lame classique.

Evidemment, tu viens nous faire un compte rendu. :D
Bon TP !
Hush
Dernière modification par Hush le 14 sept. 2021 12:13, modifié 1 fois.
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